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微生物實驗室里面的干粉培養(yǎng)基應該如何管理?

更新時間:2020-11-24      點擊次數(shù):2096

    在微生物檢驗中,干粉培養(yǎng)基的質(zhì)量關乎微生物的檢驗結(jié)果。加強對培養(yǎng)基的質(zhì)量管理,能夠有效提升微生物檢驗結(jié)果的準確性和科學性,因此需要注重培養(yǎng)基的質(zhì)量管理工作。本文從培養(yǎng)基的采購驗收、質(zhì)量控制、培養(yǎng)基制備后的質(zhì)量控制以及培養(yǎng)基的滅菌和儲存等環(huán)節(jié)簡要分析了培養(yǎng)基的質(zhì)量控制工作。

    01、干粉培養(yǎng)基供應商選擇

    培養(yǎng)基應當從可靠的供應商處采購,必要時應當對供應商進行評估。評估應確定其生產(chǎn)工藝,運輸條件是否符合規(guī)定,資質(zhì)是否齊全,質(zhì)量保證能力和生產(chǎn)能力是否符合需求。如果新增培養(yǎng)基供應商,應對該廠家所生產(chǎn)的不同批次的培養(yǎng)基理化及微生物指標進行檢測,并進行審計評估,評估合格后才可以將該品牌納入合格供應商名錄。

    02、干粉培養(yǎng)基初步驗收

    在培養(yǎng)基到達實驗室后,應安排專業(yè)的人員對培養(yǎng)基進行驗收,首先查看培養(yǎng)基的名稱是否正確、配方是否符合藥典或國標等相應的法規(guī)文件的要求、是否臨近有效期、生產(chǎn)批號是否清晰、能否提供商品質(zhì)檢報告、檢查包裝是否完整,規(guī)格、數(shù)量是否與采購申請一致。在接收完畢后安排管理人員進行入庫保存,并盡快安排對培養(yǎng)基進行入廠檢測。

    03、培養(yǎng)基理化及微生物檢測

    培養(yǎng)基的理化指標主要包括pH值、澄明度以及凝膠強度(瓊脂類),培養(yǎng)基的微生物指標一般包括:靈敏度、促生長能力、抑制能力以及指示特性,即培養(yǎng)基適用性檢查。這些指標供應商在培養(yǎng)基出廠前就已經(jīng)進行了檢測,合格后放行。使用單位驗收時仍需進行培養(yǎng)基適用性檢查,并與廠家提供的質(zhì)檢報告進行對比,看與報告內(nèi)容是否一致。使用單位也可采用有資質(zhì)的第三方檢測報告。

    04、干粉培養(yǎng)基儲存

    對入庫保存的培養(yǎng)基應張貼標簽,以區(qū)分驗收與未驗收的培養(yǎng)基,避免混淆與差錯。在此為大家提供一個簡單的標簽,僅供參考:

    使用單位存儲培養(yǎng)基時標簽也可以做編號處理,例如購進100瓶TSB,產(chǎn)品號為11104,其編號為11104-100-1、11104-100-2、...、11104-100-100按照流水號領用培養(yǎng)基,可減少對培養(yǎng)基的盤點,方便管理。

    培養(yǎng)基的儲存條件一般為常溫、干燥、密閉,當然不同供應商的存儲條件稍有差別,按照標識執(zhí)行即可。稱量后應及時旋緊瓶蓋,避免后期存儲因空氣濕度較大受潮或結(jié)塊,如出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象,該瓶培養(yǎng)基不可繼續(xù)使用。

    培養(yǎng)基開瓶后在稱量和存儲的過程中會不可避免的吸收空氣中的水分,而水分含量的增加,培養(yǎng)基的微生物負載可能亦隨之增大,進而影響到干粉培養(yǎng)基的質(zhì)量。所以干粉培養(yǎng)基在開瓶后,應定期進行復檢,并對復檢結(jié)果進行統(tǒng)計分析,確定開瓶有效期。

    如果實驗室所在地區(qū)濕度較大(相對濕度高于75%),開瓶后的培養(yǎng)基應采取適宜的保護措施,如果數(shù)量較少,可放置于干燥器內(nèi),如果數(shù)量較多,可使用封口膜瓶口位置纏繞數(shù)匝。

    05、培養(yǎng)基配制--稱量

    培養(yǎng)基的制備環(huán)節(jié),應當嚴格按照培養(yǎng)基配方制備,在培養(yǎng)基的稱量過程中,建議在干爽、無風的區(qū)域或者通風柜中進行,這樣能夠避免培養(yǎng)基吸潮使稱量結(jié)果不準。應當選擇靈敏度較高的稱重天平,這樣能夠保證稱量的準確性,同時稱量過程中要選擇的稱量匙,避免其他雜質(zhì)混入培養(yǎng)基中。操作人員應當對稱量過程進行詳細的記錄,記錄中應該體現(xiàn)培養(yǎng)基名稱、批號、稱量數(shù)量、具體配制方法、制備人姓名日期、復核人姓名日期等信息,方便后期的溯源調(diào)查。

    06、培養(yǎng)基配制--容器和水

    配制培養(yǎng)基所用的容器不得影響培養(yǎng)基質(zhì)量,一般為玻璃容器,培養(yǎng)基配制所用的容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質(zhì)殘留。在大體積配制培養(yǎng)基時,企業(yè)也可根據(jù)自己的情況采用不銹鋼容器,建議專鍋,且容器應潔凈。不建議使用陶瓷或搪瓷容器。

    培養(yǎng)基用水是培養(yǎng)基制備過程中非常重要的一個物質(zhì)。不可以使用自來水,自來水中的雜質(zhì)可能會對檢驗結(jié)果有一定的影響。許多法規(guī)在培養(yǎng)基配方中采用蒸餾水作為配制用水,實際上純化水的潔凈程度不差于蒸餾水,甚至更優(yōu),所以不必單獨制備蒸餾水,直接使用純化水即可,配制用純化水應按藥典的要求定期進行檢測。

    在制備過程中,可先加入培養(yǎng)基,再將純化水倒入容器內(nèi),同時需要將器具內(nèi)壁上的培養(yǎng)基粉末一同帶到容器中,然后根據(jù)說明書的要求進行操作。涉及到大體積配制后要分裝的培養(yǎng)基(例如TSA、TSB、FTM等),分裝前一定要將培養(yǎng)基加熱至*溶解,避免后續(xù)可能會出現(xiàn)的瓶間差異。

    07、培養(yǎng)基的滅菌

    培養(yǎng)基的滅菌過程是影響培養(yǎng)基質(zhì)量的關鍵環(huán)節(jié)。大部分培養(yǎng)基需要高溫高壓濕熱滅菌,但部分選擇性培養(yǎng)基由于一些組分不可高溫高壓滅菌,所以會采用煮沸滅菌,因此滅菌前應閱讀培養(yǎng)基使用說明。

    培養(yǎng)基滅菌應采用驗證過的滅菌程序,滅菌參數(shù)應通過無菌性試驗和促生長試驗的驗證。此外,對高溫高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗證,以保證其在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導致培養(yǎng)基過度加熱,過度滅菌會影響絕大多數(shù)的細菌和真菌培養(yǎng)基的促生長質(zhì)量。滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也會影響加熱的速度。因此應根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性,進行全面的滅菌程序驗證。

    煮沸滅菌的培養(yǎng)基建議現(xiàn)配現(xiàn)用,高溫高壓濕熱滅菌的培養(yǎng)基可以大量配制,在適宜的條件下儲存,固體培養(yǎng)基滅菌后只允許一次再融化。滅菌后培養(yǎng)基的儲存效期應進行驗證。

    制備好的培養(yǎng)基,使用前需進行pH的監(jiān)測。對于固體培養(yǎng)基pH監(jiān)測,可使用平頭電極或固液兩用電極。
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